Preparación con Tinta China
La cápsula es una capa
mucosa, más o menos gruesa que envuelve
la pared celular o de algunas bacterias. Está compuesta de polisacáridos,
mucopolisacáridos o polipéptidos. A consecuencia de su elevado contenido en
agua, se tiñen débilmente por los colorantes.
Las preparaciones
de Tinta china o nigrosina se usan para el examen microscópico directo de muchos microorganismos, para observar la presencia o ausencia de cápsula especialmente en las
levaduras.
Los
finos gránulos de la tinta china dan un fondo semi opaco, contra el que
las cápsulas claras pueden ser vistas fácilmente.
A esta tinción
también se le denomina tinción negativa ya que tiñe el fondo de la preparación
y no el microorganismo.
Esta técnica es
particularmente útil para visualizar cápsulas grandes de Cryptococcus
neoformans en LCR, esputo y otras secreciones.
Es un método de contraste.
Existen artefactos como hematíes, burbujas de aire, leucocitos, gotas de grasa
y partículas de talco que pueden interferir y confundir al analista.
Como reactivos
tenemos la nigrosina o tinta china.
Materiales:
Materiales:
- Colorante Tinta china
- Portaobjetos
- Cubre objetos
- Asa o aguja bacteriológica (depende si la muestra es líquida o de cultivo)
- Mechero
- Lápiz con borrador o cualquier otro objeto que nos sirva para presionar el cubre objeto y eliminar el exceso de muestra.
Procedimiento:
- Se le agrega 1 gota de tinta china o nigrosina en un portaobjetos.
- Se coloca una pequeña cantidad de muestra que puede ser líquida (LCR) o de cultivo. En ambos casos es de mucha importancia no añadir un exceso de muestra
- Mezclar bien sin extender.
- Se coloca un cubre objeto sobre la suspensión y se presiona suavemente para evitar que queden burbujas.
- Se observa al microscopio con objetivo de inmersión y procurar que la tinta no se seque antes de agregar la muestra ni antes de ver la preparación.
- Desechar la preparación en un recipiente con antiséptico.
La cápsula se
observa como una gran estructura alrededor de la célula delimitada por los
pequeños fragmentos de carbón de la tinta china.
La
sensibilidad de la técnica es de 50% en pacientes sin VIH y se puede
incrementar hasta 88% en pacientes VIH con meningitis criptococósica.
Ámbar Moreno
8-863-1855
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